Бактериальный мазок (мазок на флору) – первый этап диагностики инфекционно-воспалительных заболеваний уха, горла, и носа. Данное исследование в числе прочих проводятврачи-оториноларингологи нашего центра.
Бактериальный мазок показан для диагностики таких заболеваний ЛОР органов, как:
риниты- синуситы (гайморит, фронтит, этмоидит, сфеноидит)
- фарингиты
- ларингиты
- тонзиллиты и ангины
- евстахииты
- наружные и средние отиты.
Эти заболевания сопровождаются кашлем, истечением носовой слизи, отделяемым из наружного слухового прохода, местными болями в горле, ухе, и другими типичными симптомами. Нередко они сочетаются с воспалительными процессами в бронхах, легких. Общее состояние при этом ухудшается. В особо тяжелых случаях развивается воспаление мозговых оболочек (менингит), что таит в себе угрозу для жизни пациента.
В подавляющем большинстве случаев инфекции ЛОР органов обусловлены неспецифической бактериальной флорой (стафилококки, стрептококки, дифтерийная палочка, кишечная палочка, и др.).
Редко заболевания ЛОР органов вызываются кандидозным грибком (грибок рода Кандида). Крайне редко причиной заболевания является специфическая инфекция – возбудители туберкулеза, сифилиса, гонореи.
Зачастую мы берем мазок на флору не с диагностической, а с профилактической целью. Профилактическому обследованию подлежат следующие категории лиц:
- проходящие медосмотр по поводу приема на работу – все, контактирующие с широким кругом лиц, в т.ч. учителя, работники общепита.
- дети при оформлении в дошкольные учреждения (ясли, детсады), а также школьники
- беременные при постановке на учет, а также во время плановых медицинских осмотров и перед родами
- контактирующие в быту с заболевшими острыми инфекционными заболеваниями
- находящиеся в очагах эпидемиологических вспышек, в т.ч. и в дошкольных, школьных и производственных коллективах
- пациенты перед плановыми оперативными вмешательствами.
кроме того, мы повторно берем мазок для определения динамики заболеваний ЛОР органов и контроля эффективности их лечения.
Перед взятием мазка необходимо провести некоторые гигиенические мероприятия: освободить нос от слизи, прополоскать рот. Вместе с тем, использовать назальные спреи, антисептики для полоскания рта, и другие средства местного действия, нежелательно. Антибиотики тоже могут исказить результат. Разумеется, отказаться от них можно не всегда. В любом случае, о факте приема этих средств нужно информировать врача.
Сама процедура осуществляется в положении сидя. Мазок берут путем соскоба. Для этого используется ватный тампон, фиксированный на пластиковом стержне. Соскоб берется с полости носа, из зева, и с наружного слухового прохода. Для каждого участка используется отдельный стерильный тампон.
Процедура взятия мазка безболезненна – медсестра легко проводит тампоном по исследуемому участку. Правда, у некоторых обследуемых соприкосновение тампона со слизистой зева может спровоцировать рвотный рефлекс. Таким рекомендуют взятие материала натощак. Хотя это не является обязательным условием.
После взятия материала тампон на стержне помещают в пробирку, и направляют в лабораторию. Дальнейшее исследование предполагает микроскопию окрашенного препарата или посев на питательные среды.
В исследуемом материале может выявляться патогенная и условно-патогенная флора. Патогенная – та, которая обязательно вызывает заболевание (возбудители коклюша, дифтерии, менингококки). Условно-патогенная часто присутствует у клинически здоровых лиц, и приводит к заболеванию лишь при снижении иммунитета.
Это многие виды стафилококков, стрептококков, а также кишечная палочка, кандидозный грибок. О степени патогенности судят по величине КОЕ/мл, где КОЕ – колониеобразующие единицы. Максимальный срок результата исследования и подготовки заключения – 2 нед.
Взятие мазка из верхнего отдела респираторного тракта пациента представляет собой манипуляцию, которую выполняет квалифицированный медицинский специалист для осуществления дальнейшего лабораторного исследования, позволяющего обнаружить наличие вирусов и болезнетворных бактерий. В зависимости от подозреваемого инфекционного возбудителя изъятый биоматериал используют для выполнения бактериологических, иммуноферментных и молекулярно-биологических тестов.
Для получения достоверных результатов важное значение отводится правильному выбору биологического материала, его отбору, хранению и использованию – образец должен соответствовать характерной для конкретного патологического процесса нозологии, содержать максимальное количество инфекционного возбудителя и быть доступным для получения неинвазивным способом. Для диагностирования острых вирусных заболеваний используют материал из респираторного тракта, соответствующий локализации поражения – при инфекции верхнего отдела мазки отбирают из носо- и ротоглотки.
На сегодняшний день основное показание для взятия мазка – подозрение на инфицирование новым штаммом коронавируса SARS-CoV-2. Полученный образец подвергается лабораторному исследованию с помощью полимеразной цепной реакции.
Биоматериал, который отбирают для выявления возбудителя COVID-19, является высоко контагиозным (заразным).
Именно поэтому в клинике «Проксима» процедуру проводят в отдельном хорошо вентилируемом помещении, а медицинский персонал использует средства индивидуальной защиты – фильтрующую маску, халат из флизелиновой ткани, надетый под непромокаемый комбинезон, очки, щиток, две пары перчаток.
Для проведения исследований, позволяющих обнаружить коронавирус SARS-CoV-2, используются несколько вариантов наборов для взятия мазка:
- Коммерческий, содержащий контейнер с вирусологической средой и гибкий пластиковый зонд с нанесенными волокнами химически обработанного текстиля.
- «Нome-made» — для получения материала со слизистых покровов горла и носа, которые содержат:
- стерильные зонды-тампоны, флокированные вискозой, дакроном либо искусственным шелком;
- пробирки со стерильным буферным раствором, объем которого позволяет погрузить кончик зонда-тампона.
Тип субстрата и зонда-тампона зависит от вида инфекционного возбудителя и планируемого метода исследования.
Отбор биоматериала для проведения ПЦР-теста осуществляется только с помощью зондов-тампонов с синтетическим волокном, которое наматывается на пластиковый стержень – это позволит избежать замедления протекания полимеразной цепной реакции (применение органических материалов и энтеросорбента кальция альгиново-кислого может привести к ингибированию ПЦР). Стержень зонда-тампона содержит заводскую отметку (на эту глубину он должен быть помещен в пробирку) и сужение (на нем его нужно сломать после помещения в емкость).
Наша клиника предоставляет услугу «Взятие мазка в домашних условиях» — процедуру выполняет только один человек. Покидая дом пациента, медицинский работник выполняет следующий алгоритм действий:
Деконтаминирует руки.- Снимает комбинезон и внешние перчатки.
- Вновь обеззараживает руки и надевает новые перчатки.
- Помещает контейнер с отобранной пробой во вторичную упаковку, содержащую абсорбирующий слой, и плотно закрыть ее.
- Дезинфицирует руки и внешнюю поверхность вторичной упаковки.
- Помещает направление с информацией о пациенте в конверт, запечатывает его и прикрепляет к внешней упаковке.
- Упаковывает образец в основной контейнер.
Максимальная концентрация «виновника» коронавирусной инфекции на слизистых покровах носоглотки и задней стенки ротоглотки наблюдается на 2-й и 3-й дни с момента появления характерных для COVID-19 симптомов (общего недомогания, снижения работоспособности, лихорадки, нарушений обоняния и вкуса, ринореи, кашля, озноба, затруднения дыхания). В связи с данным фактом считается, что отбирать образец биоматериала желательно именно в эти сроки. Однако, молекулярно-биологический метод позволяет обнаружить фрагменты генетического материала и гораздо ранее – в инкубационном периоде (когда инфекционный возбудитель находится в так называемом «спящем состоянии»).
Чтобы избежать получения некорректных итоговых данных исследования, образец биологического материала отбирают до выполнения полоскания и других лечебных манипуляций, на голодный желудок пациента либо не раньше, чем спустя 2 часа после употребления жидкости и пищи.
Взятие мазка на анализы | Университетская клиника
Взятие мазка – это метод забора биологического материала для лабораторного анализа. На исследование берут клетки эпителия, участки слизистых оболочек, слизь. Процедура получения материала занимает всего несколько секунд и, практически, всегда безболезненна для пациента. Полученные клетки исследуют в лаборатории при помощи мощных микроскопов и путем проведения химических реакций.
Взятие мазка в клинике
Для выявления многих заболеваний этот метод остается ведущей диагностической методикой.
Откуда берут мазки?
Пробу для клинического исследования берут из:
- половых путей;
- зева;
- носоглотки;
- слизистой оболочки глаз;
- прямой кишки;
- уретры.
Полученный материал позволяет диагностировать различные инфекции, воспаления, дисплазию клеток, доброкачественные новообразования, раковые опухоли.
Взятие мазка для исследования часто становится основой для постановки окончательного диагноза и назначения своевременного лечения.
Поэтому в медицине широко применяют забор соскобов и мазков для эффективной диагностики и лечения разных заболеваний.
Взятие гинекологического мазка
Гинекологический мазок берут для оценки состояния половых путей женщины. Анализ клеток из влагалища и цервикального канала помогает выявить хронические воспаления, половые инфекции, обнаружить развитие женской онкологии на ранних стадиях.
https://www.youtube.com/watch?v=YlgUen3jg18\u0026t=10s
В профилактических целях мазки берут ежегодно у всех женщин репродуктивного возраста. Внеочередной забор материала может понадобиться при:
Женщинам с отягощенной наследственностью мазок из шейки матки и влагалища рекомендуют сдавать 2 раза в год. Взятие мазка из половых путей женщин проводит гинеколог во время осмотра пациентки на кресле. Врач собирает биоматериал из влагалища, наружного зева матки и канала шейки матки.
В гинекологии берут несколько типов анализов.
Гинекологический мазок на флору
Материал помогает оценить степень микробной чистоты влагалища. Взятие мазков на флору – безболезненная процедура. Однако результаты этого анализа дают врачу важную информацию о состоянии естественной микрофлоры и заражении патогенными микроорганизмами.
Исследование позволяет диагностировать такие патологии:
Для анализа состава микрофлоры применяют метод микроскопии с окрашиванием по Граму. Методика основана на способности бактериальной клетки по-разному реагировать на контакт с анилиновыми красителями:
- Грамположительные бактерии – окрашиваются в синий (фиолетовый) цвет. Эти микроорганизмы отличаются простым строением, а их клеточная оболочка очень чувствительная к воздействию антибактериальных препаратов.
- Грамотрицательные бактерии – при воздействии красителя обесцвечиваются. Их клеточная стенка имеет сложное строение. Это позволяет им сохранять устойчивость к большинству антибиотиков. Именно грамотрицательные бактерии чаще всего вызывают патологии женской половой системы.
После окрашивания по Граму и исследования материала под микроскопом, используют метод бактериологического посева клеток на питательную среду. Оказавшись в благоприятных условиях микроорганизмы начинают активно расти, образуя колонии. Эти колонии идентифицируют, после чего испытывают на чувствительность к антибиотикам. Это важно для назначения эффективного лечения.
Взятие мазка на чистоту влагалища точно определяет возбудителя болезни и оценивает его чувствительность к антибактериальным препаратам разных групп.
Мазок на скрытые инфекции
Ряд заболеваний половой системы протекают без симптомов и могут никак не проявлять себя на протяжении многих лет. При этом они нарушают половую и репродуктивную функцию, вызывают бесплодие, нарушают развитие плода во время беременности.
К скрытым инфекциям относят:
Общий анализ мазка на флору не позволяет диагностировать скрытые инфекции. Выявить такие возбудители может только специальный тест по методу полимеразной цепной реакции (ПЦР).
После взятия мазка на скрытые инфекции, материал направляют в лабораторию для проведения ПЦР-диагностики. Техника позволяет точно определить специфические ДНК молекулы патогенных микроорганизмов. Методика очень точная и чувствительная. Даже одна микробная клетка в образце может быть выявлена во время анализа.
Взятие мазка на онкоцитологию
Это анализ клеточной структуры тканей половых органов. Взятие мазка из цервикального канала проводят при подозрении на дисплазию эпителия и онкологию. Это наиболее эффективный способ ранней диагностики злокачественных опухолей. Забор мазка из цервикального канала также информативен при хроническом воспалении и половых инфекциях.
В лаборатории мазок на онкоцитологию окрашивают и исследуют под мощным микроскопом для выявления аномалий и дефектов строения клеток. По результатам взятия мазков на цитологическое исследование пациентка получает один из пяти типов цитограмм:
- 1 класс – атипичные клетки отсутствуют (норма);
- 2 класс – выявлены воспалительные изменения структуры клеток;
- 3 класс – имеются выраженные признаки дисплазии ткани;
- 4 класс – подозрения на рак и эрозию шейки матки;
- 5 класс – онкологический процесс.
Подготовка к получению материала
Взятие мазка у гинеколога простая процедура. Однако, чтобы получить достоверный результат, к ней следует правильно подготовиться. Материал не берут во время менструации, поскольку кровянистые выделения могут попасть в пробу и повлиять на качество результата. Это необходимо учитывать при планировании даты посещения гинеколога.
Подготовка к забору соскоба включает простые рекомендации:
- за 2-3 дня нужно прекратить использование вагинальных препаратов, интимной косметики, лубрикантов;
- за 5-7 дней желательно отказаться от спринцевания;
- в течение 2-3 суток рекомендуется сохранять половой покой;
- в день забора нужно проводить интимную гигиену только с помощью теплой воды без антисептических гигиенических средств.
При обострении хронических заболеваний половых органов лучше отложить сдачу материала до наступления ремиссии. Секрет, который выделяется при активном размножении микробов, может исказить результаты.
Техника взятия мазков в гинекологии
Техника взятия мазков из половых путей зависит от типа назначенного исследования. Перед забором материала гинеколог обычно осматривает стенки влагалища и шейки матки в зеркалах.
- Взятие мазка на микрофлору. Процедура выполняется медицинским шпателем. Пробы собирают из шейки матки, влагалища, внешнего зева уретры. Биоматериал переносят на стерильное медицинское стекло, равномерно распределяя по его поверхности. На стекле врач помечает участки, в которых были собраны образцы, латинскими буквами (например, V – влагалище);
- Взятие мазка на цитологию и инфекции. Для взятия клеток врач использует цитощеточку и стерильные тампоны. Предварительно шейку матки очищают от слизи медицинскими тампонами. Цитощеткой доктор собирает образцы из влагалища и шеечного канала. Если назначено исследование на инфекции, щеточку помещают в физраствор. Если материал берут для цитологического теста, пробы наносят на медицинское стекло.
Взятие мазка на цитологию
После взятия мазка на цитологию появляются слабые кровянистые выделения. Это норма, так как на тканях органов остаются микротрещины. Уже через 2-3 дня примесей крови в выделениях отмечаться не должно.
Мазок из зева и носа
Взятие мазка из зева и носа проводят для оценки микрофлоры носоглотки и ротовой полости. Бактериологическое исследование проводят для диагностики таких инфекций:
- герпес 1 и 2 типа;
- стафилококк;
- менингококк;
- стрептококк;
- дифтерия;
- коклюш;
- гемофильная палочка.
Исследование назначают при ангине, рините, туберкулезе, фарингите. Анализ помогает быстро определить тип возбудителя и назначить эффективное лечение. Процедура забора проста и безболезненна.
Врач аккуратно помещает ватную палочку в ротовую полость и прижимает ее к верхней стенке. Полученный материал помещают в плотно закрывающуюся пробирку. Второй палочкой врач собирает носовую слизь и помещает пробу на медицинское стекло.
Для взятия биоматериала доктор использует только одноразовые и стерильные инструменты.
Доктор берет мазок из зева
Взятие бактериологического мазка из носа и зева требует предварительной подготовки:
- до забора биоматериала не рекомендуется принимать пищу;
- за два часа до процедуры нельзя пить;
- в день посещения врача нельзя чистить зубы и пользоваться ополаскивателями для ротовой полости;
- за 2-3 суток до забора соскоба из носа нельзя использовать антибактериальные препараты (капли, мазь, спрей).
Несоблюдение этих рекомендаций часто приводит к ложным результатам анализа.
Проба из конъюнктивы
Инфекционные болезни глаз приводят к снижению остроты зрения. Для ранней диагностики офтальмологических инфекций проводят забор пробы из конъюнктивы. Взятие мазка из глаза показано при гнойных выделениях, отеке слизистой, воспалений в области глазного яблока. Исследование помогает определить тип возбудителя и назначить оптимальное лечение.
Взятие мазка на бактериологическое исследование из глаз – болезненная процедура. Поэтому предварительно врач проводит местное обезболивание конъюнктивы. Для этого используют глазные капли с лидокаином.
Доктор оттягивает нижнее веко и проводит ватным тампоном от внутреннего угла к внешнему. Чтобы получить качественный материал, нужно провести по веку тампоном 3-4 раза. Для каждого глаза используется отдельный тампон.
Врач помещает биоматериал в питательную среду или переносит на медицинское стекло.
Проба из конъюнктивы
Образец хранится не более месяца при температуре до 20 градусов. Для анализа глазного отделяемого применяют цитологический и бактериологический метод, бактериоскопию. Тип исследования определяет врач:
- Цитология – проводится при наличии гнойных выделения, чтобы определить причину неприятных симптомов и исключить злокачественную опухоль;
- Бакпосев – выполняют для выявления инфекции и определения чувствительности возбудителя к разным типам антибиотиков;
- Бактреиоскопия – назначается при подозрении на бактериальную патологию. Анализ позволяет выявить стафилококк, хламидии, грибок, кишечную палочку.
Чтобы получить точный результат, в день исследования откажитесь от косметики и водных процедур для лица. За сутки до сдачи соскоба нужно прекратить использование любых препаратов для глаз. Обязательно сообщите врачу о прохождении терапии гормонами или антибиотиками.
Урогенитальный мазок у женщин
У женщин мазок из уретры берут обычно одновременно с забором материала из влагалища и шейки матки. Врач гинеколог или уролог вводит в просвет уретры небольшое зеркальце. Дальше для забора материала используют одноразовый шпатель.
Это небольшой пластиковый инструмент с расширенным концом, которым аккуратно надавливают на ткани недалеко от входа в уретру. Взятый образец переносят на стерильное предметное стекло, помечают буквой «U» (уретра), подсушивают.
Полученный материал отправляют в лабораторию.
Урогенитальный мазок у женщин
Во время исследования материал окрашивается по Граму, после чего подвергается микроскопированию. Лаборант оценивает образец по таким показателям:
- клетки плоского эпителия;
- количество лейкоцитов в материале;
- золотистый стафилококк;
- общее количество палочек в образце;
- общее количество кокков в образце;
- грибок (в частности грибы рода Candida).
Если во время микроскопии доктор заподозрил патологию, проводят дополнительную диагностику. Одна из методик дополнительного анализа урогенитального мазка – ПЦР-диагностика.
Урогенитальный мазок у мужчин
Взятие урогенитального мазка у мужчин выполняет врач уролог или андролог. Материал у мужчин берут обычно при наличии патологических симптомов. Показания для этого исследования:
- выделения из уретрального канала (серозная жидкость, гной, кровь);
- зуд, жжение, отек тканей наружных половых органов;
- высыпания на гениталиях;
- боль, дискомфорт во время мочеиспускания;
- учащенные позывы в туалет;
- бесплодие;
- обнаружение половой инфекции у партнерши, с которой был незащищенный половой контакт;
- прохождение профилактического осмотра.
Исследование отделяемого из уретры у мужчин может проводиться по двум методикам:
- окрашивание по Граму и микроскопия на флору;
- ПЦР-диагностика на скрытые инфекции.
ПЦР анализ у мужчин
Чтобы добиться максимальной информативности анализа, перед забором материала необходимо подготовиться. За 2 дня желательно воздержаться от половых актов.
Гигиенические процедуры лучше проводить без косметических средств, особенно антибактериального действия. Непосредственно перед взятием мазка нельзя мочиться 2-3 часа.
Это связано с тем, что моча может смывать патологические клетки и микроорганизмы со стенок уретры. За несколько часов микрофлора мочевыделительного канала восстанавливается.
Чтобы не допустить проникновение в образец бактерий с поверхности полового члена, перед забором мазка головку необходимо тщательно вымыть чистой водой. Далее дожидаются, когда кожа полностью высохнет, после чего обрабатывают головку физраствором.
Отделяемое из уретры берут при помощи специального зонда. Это тонкий инструмент, который вводят в мочеиспускательный канал на глубину 1-2 см. После этого врач выполняет несколько вращательных движений, чтобы получить клетки эпителия. Мужчины при этом часто испытывают дискомфорт.
Полученный материал направляют на исследование в лабораторию. Образец оценивают по таким показателям:
- лейкоциты;
- клетки эпителия;
- микрофлора;
- слизь;
- трихомонады;
- гонококки.
При проведении ПЦР-диагностики определяют скрытые половые инфекции.
Провести лабораторное исследование мазков можно в медицинском центре Университетская клиника в Санкт-Петербурге.
Информация для отоларингологов
МАЗКИ ИЗ ЗЕВА
Материал не следует брать при воспаленном надгортаннике, так как может возникнуть обструкция дыхательных путей.
МАЗКИ ИЗ НОСА
МАЗКИ ИЗ РОТОГЛОТКИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА КОКЛЮШ
МАЗКИ ИЗ НОСОГЛОТКИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА МЕНИНГОКОКК
АСПИРАТ ИЗ ПАЗУХ
ЖИДКОСТЬ ПРИ ТИМПАНОЦЕНТЕЗЕ
ОТДЕЛЯЕМОЕ ИЗ НАРУЖНОГО СЛУХОВОГО ПРОХОДА.
Биологический материал со слизистых оболочек верхних дыхательных путей
Сбор материала для культуральных исследований и микроскопии необходимо проводить до назначения специфической противомикробной терапии. Несоблюдение данного условия может привести к ложноотрицательному результату исследования. материал берут натощак или через 3-4 ч после еды.
Для более полного открытия глоточного отверстия рекомендуется по время забора материала надавливать шпателем на корень языка. Важно, чтобы при извлечении тампона он не касался зубов, щек, языка.
Для сбора мазков из носоглотки и ротоглотки используются стерильные зонды, которые после сбора материала погружают в контейнеры с транспортной средой, обеспечивающей стабильность и сохранение ростовых свойств микроорганизмов.
Тип зондов, состав транспортных сред, методику сбора, а также условия хранения и транспортирования клинического материала следует уточнить в инструкции к используемым реагентам.
Хранение образцов
- Для культуральных исследований и микроскопии – при температуре 2–8°С не более 24 ч.
- Для выявления РНК/ДНК:
- при температуре 2–8°С – в течение 3 сут.;
- при температуре минус 16–20°С – до 3 мес.;
- длительно при температуре не выше минус 68°С.
Допускается лишь однократное замораживание–оттаивание материала.
Мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки для выявления РНК/ДНК – рекомендуется совмещать мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки в одной пробирке.
Для этого сначала берут мазки разными зондами со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки, при этом рабочие концы зондов после взятия мазков у пациента помещаются в одну пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков, и исследуются как один образец.
Материал берется после полоскания полости ротоглотки кипяченой водой комнатной температуры. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. В течение шести часов перед процедурой нельзя использовать медикаменты, орошающие носоглотку или ротоглотку и препараты для рассасывания во рту.
Мазки со слизистой носоглотки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.
Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых).
После забора материала конец зонда с тампоном опускают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков до места слома, при этом гибкая часть зонда сворачивается спиралью, далее, прикрывая сверху пробирку крышкой, рукоятку зонда опускают вниз, добиваясь полного отламывания верхней части зонда.
Пробирку герметично закрывают. Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами из полистирола с вискозными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды и зондом с мазком из носоглотки. Конец зонда с тампоном отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку.
Смыв из ротоглотки для диагностики эпидемического паротита (выделение РНК). Перед взятием смывов из ротоглотки проводят предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 с) 25-40 мл изотонического раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через стерильную воронку в стерильный флакон на 50 мл.
Хранение образцов
- при комнатной температуре – в течение 6 ч.
- при температуре от 2°С до 8°С – в течение 3 суток
- при температуре минус 20°С – в течение 1 недели
- при температуре минус 70°С – длительно
Мазки из ротоглотки и носа для диагностики дифтерии, пневмококковой, стафилококковой, стрептококковой инфекции (культуральные исследования) – для взятия материала используется сухой стерильный ватный тампон, вмонтированный в пробку пробирки или готовые транспортные среды, отдельным тампоном из ротоглотки и из носа. Взятие мазков осуществляют натощак или не ранее двух часов после еды, не касаясь тампоном языка, внутренних поверхностей щек и зубов.
Мазки из ротоглотки и носа для диагностики менингококковой инфекции (культуральные исследования) – тампон вводят через ротовую полость ватным концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2–3 раза по задней стенке.
При извлечении из ротоглотки тампон не должен касаться окружающих тканей (зубы, слизистая щек, язык, небный язычок). После извлечения тампона содержащуюся на нем слизь засевают на чашки (сывороточный агар и сывороточный агар с линкомицином) или помещают в транспортную среду для немедленной доставки в лабораторию.
Допускается применение коммерческих питательных транспортных сред разрешенных к применению в Российской Федерации в установленном порядке.
Мазки из носоглотки для диагностики гриппа (культуральные исследования) собирают стерильными зондами с вискозными тампонами из нижнего носового хода.
Зонд с тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход глубоко, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых).
После взятия материала тампон, не нарушая стерильности, помещают в пробирку с 2,0–5,0 мл вирусологической транспортной среды. Материал хранят в течение 24 ч при температуре 2–8°С, более длительно – при температуре не выше минус 16°С.
Мазки из носоглотки для диагностики коклюша (культуральные исследования) собирают стерильными зонд-тампонами с вискозным наконечником на алюминиевой основе, вмонтированный в пробку и пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем.
Зонд извлекают из упаковки, вводят через носовые ходы и удерживают в носоглотке в течение 10 сек, чтобы он пропитался отделяемым слизистой носоглотки. После этого тампон извлекают, делая упор на боковую стенку носа, и немедленно помещают в пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем.
Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить в холодильнике при температуре 2–8°С не более 12 ч).
Заднеглоточные мазки для диагностики коклюша (культуральные исследования) собирают стерильным зонд-тампоном с вискозным наконечником на алюминиевой основе, вмонтированным в пробку, вносят в пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем.
Целесообразно использовать готовые комплекты. Зонд извлекают из упаковки, пробирку со средой вскрывают, конец зонда (на расстоянии 2 см от конца с тампоном) помещают в пробирку и изгибают под углом 135°, делая упор на внутренний край пробирки, и извлекают из пробирки.
Аккуратно прижимая язык пациента шпателем, вводят изогнутый тампон в ротовую полость ниже язычка и собирают материал с задней стенки глотки, не задевая язык, слизистую оболочку щек и миндалины.
Зонд с биоматериалом помещают в пробирку со средой AMIES, следя за тем, чтобы пробка, в которую вмонтирован тампон, плотно закрывала пробирку. Пробирки с транспортной средой AMIES до использования хранят при комнатной температуре.
После взятия материала тампон, не нарушая стерильности, помещают в пробирку с 2,0–5,0 мл вирусологической транспортной среды. Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить в холодильнике при температуре 2–8°С не более 12 ч).
Метод «кашлевых пластинок» для диагностики коклюша (культуральные исследования): чашку со средой (Борде-Жангу или КУА с антибиотиками и добавлением 20% или 10% крови животных соответственно), хранящуюся при температуре 2–8°С, выдерживают при комнатной температуре, подносят на расстоянии 8–10 см ко рту кашляющего ребенка и удерживают ее в течение нескольких секунд (6–8 кашлевых толчков). Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить при температуре 2–8°С не более 12 ч).
Мазки со слизистой носоглотки для диагностики кори (культуральные и исследования, выделение РНК) – для взятия материала используют стерильный ватный тампон, которым протирают слизистую оболочку носоглотки с достаточным усилием, чтобы снять часть эпителиальных клеток.
Тампоны помещают в маркированные стерильные пробирки с завинчивающимися крышками, в которых содержится 2–3 мл транспортной среды для вирусов. Если образец не может быть доставлен в вирусологическую лабораторию в течение 48 часов при температуре 4–8°С, пробирку с тампоном следует энергично встряхнуть так, чтобы смыть клетки, а затем извлечь тампон.
Смывы центрифугируют при температуре 4°С при 500g (1500 об./мин) в течение 5 минут, затем осадок ресуспендируют в 2 мл питательной среды для клеточных культур.
Ресуспендированный осадок и надосадочную жидкость хранят раздельно при температуре –70°С и транспортируют в лабораторию на сухом льду в герметично закрытых флаконах, чтобы избежать попадания в них углекислоты.
Мазки из носоглотки для обнаружения антигенов внутриклеточных патогенов собирают стерильными зондами с вискозными тампонами из нижнего носового хода. Зонд с тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины.
Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину глубоко (вплоть до слез у пациента), делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После взятия материала тампон помещают в пробирку с 3 мл 0,1 моль/л фосфатно-солевого буферного раствора.
Для получения суспензии клеток тампон в пробирке тщательно отжимают о стенки пробирки, тампон удаляют, пробирку закрывают. Проводят центрифугирование в течение 5 мин при 3000 об/мин для осаждения клеток.
Надосадочную жидкость осторожно удаляют, а осадок клеток ресуспендируют в нескольких каплях фосфатно-солевого буферного раствора и наносят на предметные стекла (не менее 3 шт.) раздельными каплями. Препарат высушивают и фиксируют 10 мин в охлажденном до 2–8°С химически чистом ацетоне. Фиксированные предметные стекла хранят при температуре 2–8°С не более 6–7 дней.
Загрузка...
